بررسی و بهینه¬سازی برخی عوامل موثر بر انتقال ژن بتا-گلوکورونیداز (gusa) با واسطه آگروباکتریوم در سیب پاکوتاه (malus domestica.borkh var.gami almasi)

سیب گمی­الماسی یکی از ارقام پاکوتاه سیب است که منشاء آن شمال­غرب ایران بوده و به لحاظ ویژگی های مناسب از نظر باغبانی حائز اهمیت می­باشد. انتقال ژن با استفاده از آگروباکتریوم یکی از روش­های تراریختی است که تاکنون در مورد بسیاری از گونه ها و ارقام انجام گرفته است. بهینه سازی عوامل مختلف تاثیر گذار در تراریختی و باززایی گیاهان تراریخت لازمه برنامه های انتقال ژن محسوب می شود. در این پژوهش با استفاده از انتقال ژن بتا گلوکورونیداز برخی از عوامل موثر در تراریختی سیب گمی برای اولین بار در ایران مورد بررسی قرار گرفت. سویه آگروباکتریوم، غلظت باکتری، مدت زمان تلقیح، طول مدت کشت همزمان و نوع محیط القای بیماری زایی باکتری و تاثیر آن­ها در میزان تراریختی، از عوامل مورد بررسی بودند. در آزمایش­های تراریختی غلظت موثر کانامایسین برای انتخاب تراریخت ها 50 میلی گرم در لیتر به­دست آمد و از بین تیمار های مختلف سویه gv3850 نسبت به gv3101 موثرتر بود. بر اساس نتایج دو روز کشت همزمان و استفاده از محیط lb به­عنوان محیط آلودگی آگروباکتریومی نسبت به ab مناسب تر تشخیص داده شد. درصد تراریختی در بهترین تیمار 2 درصد بود.